山东乡村牧业是农业部、山东省畜牧局的牛羊驴供种牧业,是目前鲁西南地区存栏量大,品种全、强的集养殖、育种、科研、调拨、推广于一体的大型“畜牧养殖示范企业”之一。ysjsf8347x
实验结果分析表明两种受体、两种季节分别于不同季节(春季两批次、秋。季和初冬各一批次)采用同一种同期程序处理后总平均率达7256%,(886/1221),不同受体和不同季节间同期率呈现一定差异。湖羊各批次间同。期率在6154%至9588%(平均7583%)。小尾寒羊为55%至7714%(平均。硕士论文,孙洁杜泊绵羊冷冻移植研究,6937%),各批次湖羊同期率均高于小尾寒羊,其中秋、冬季出了极显,著差异(P005),同种受体同期处理随季节,不同其效果亦存在差异,两种受体羊秋、冬季同期率均极显著高于春季。 供体的选择与饲养管理 供体母羊系由澳大利亚引进和山东省农业科学 院畜牧兽医研究所引进冷冻移植生产的纯种杜 泊绵羊 年龄为 ~ 40个月 健康 无繁殖 体况 良好, 超排 FSH为新西兰生产 ( mL/支 ) 、孕酮 栓 CIDR为新西兰生产 ( g/支 ) 、海绵 栓为澳大利亚生产 ( g/支 ) 、PMSG为宁波 制品有限公司生产 ( IU/支 ) 、保存液和冲 胚液均产自澳大利亚 , 供体羊超数与配种 供体羊在周期的任意 埋植孕酮 栓 CIDR 在第 12天开始超排处理 FSH总剂 量 mL 采用剂量逐日递减法处理 d 每天上下 午注射各 1次 间隔 h 在埋植 CIDR的第 天取栓 同时用加双抗 ( 80万 IU青霉素 +100万 IU硫酸链霉素 )的盐水冲洗 。
右侧两孔分。别移入2m1保存液,然后四孔都用矿物油覆盖,置恒温板上预热待用,4、培养皿的在培养皿中用保存液分别做3个滴,一滴用来清洗,移植头,一滴放解冻好待装入移植头的,另一滴是移植头装,前事先的保存液,3个滴分开分类使用可以避免因操作不小心引起的的,丢失。162解冻的方法,从液氮罐提子中取出一支细管,室温下7s-10s后置入水浴锅中,解冻20s^-。50s擦干细管,用细管剪刀剪去毛细管封口端。用推针从棉栓端将推入空。培养皿内,置实体显微镜下迅速分拣,拣出的移入4孔板左侧解冻液中。 该方法适用。于冷冻法保存的,由于目前冷冻法己经不再使用,所以慢速解冻也。基本上不再使用。快速解冻通常是以300C -miri 1^3600C-min’的速度使在,30s^-40s内从一196℃迅速上升至室温。使能在瞬间通过危险性致死温区。避,免胞内冰晶的形成,从而有效保护。快速解冻效果优于解冻,广。泛应用的解冻方法是37℃水浴解冻,解冻后的需尽快脱除保护剂,一方面冷,冻保护剂本身对有一定的另一方面含较高浓度冷冻保护剂的直接,移入受体或移入PBS液都会因细胞内外存在较大的渗透压差而产生膨胀导。
致细胞崩解此外。冷冻保护剂对受体道也具有性。多采用蔗糖,液一步或两步法脱除里的保护剂。在室温(250C -260C)下,在用PBS配制的。mo1-L1^-05mo1-L‘的蔗糖液中保持5min-Omin直到恢复至冻前状态,近年来科学家也在研究细管内直接带脱除保护剂的方法或选择无需脱除就可移,植的保护剂,3鉴定,31的发育阶段,在精卵结合后的一定时间内,的发育基本经过了1细胞(1-cell) 2细胞。(2-cell) 4细胞(4-cell) 8细胞(8-cell)、桑fJK(morula)和囊胚(blastocyst)等阶段。